大鼠维生素B6(VB6)Elisa试剂盒 细胞生物学研究

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA) 。往预先包被免疫球蛋
白E (IGE) 抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，
经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝
色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白E
(IGE)呈正相关。用酶标仪在450NM波长下测定吸光度(OD 值)，计算样品浓
度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血
液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆: EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液: 3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测，请按-次用量分装，冻存于-20°C, 避免反
复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品
1.酶标仪(450NM)
2.高精度加样器及枪头: 0.5-10UL、 2-20UL、20-200UL、 200-1000UL
3.37°C恒温箱
操作注意事项
1.试剂盒保存在2-8°C,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结
晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经
稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。