不知道TRIS缓冲液怎么配制?速普尔告诉你

产品名称：三羟甲基氨基甲烷

别名：氨基丁三醇

英文名：Tris(hydroxymethyl)aminomethane

CAS号：77-86-1

包装规格：25kg纸板桶

分子式：C4H11NO3

分子量：121.14

含量：≥99.5%

外观：白色结晶颗粒

质量标准：企业标准

用途：平衡酸碱值（生物缓冲剂）

医药：中间体（制备磷霉素单氨丁三醇、酮咯酸氨丁三醇、积雪草酸氨丁三醇、右旋酮洛芬氨丁三醇等药物的中间体）滴眼液、眼镜护理液：pH缓冲剂、抗菌剂。

TRIS作为常用生物缓冲液的一种，常用于生物化学实验中的TAE和TBE缓冲液（用于核酸的溶解），其氨基可以与醛发生缩合反应。Tris为弱碱，Tris碱的水溶液pH在10.5左右，一般加入盐酸以调节pH值至所需值，即可获得该pH值的缓冲液，其缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间，但应注意温度对于Tris的pKa的影响，在室温25℃下，pKa为8.1。

Tris缓冲液配置方法：

Tris-HCl，Tris-EDTA的配制：

一、1M Tris-HCl (pH 7.4，7.6，8.0) 配制1000ml

配制方法：

1.称量121.1g Tris置于1000ml烧杯中。

2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3.按下表加入浓HCl量调节所需要的pH值。

  PH值          浓HCI

   7.4             约70ml

   7.6             约60ml

   8.0             约42ml

4.将溶液定容至1000ml。

5.高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

二、1.5M Tris-HCl (pH 8.8)配制1000ml

配制方法：

1.称量181.7g Tris置于1000ml烧杯中。

2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3.用浓HCl调节pH值至8.8。

4.将溶液定容至1000ml。

5.高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

三、TE即Tris-EDTA buffer（10mM Tris，1mM EDTA，pH7.4 pH7.6 pH8.0）。

10×TE Buffer (pH 7.4，7.6，8.0) 100mM Tris-HCl，10 mM EDTA 配制1000ml

配制方法：

1. 量取下列溶液，置于1000ml烧杯中。

①1M Tris-HCl Buffer(pH7.4，7.6，8.0) 100ml；

②500mM EDTA(pH8.0) 20ml

2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，均匀混合。

3.将溶液定容至1000ml后，高温高压灭菌。

4.室温保存。

注意事项：

1、缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍，pH值的变化大于0.1；

2、 温度效应大，温度变化对缓冲液pH值的影响很大，△pKa／℃＝－0.031，例如：4℃时缓冲液的pH＝8.4，则37℃时的pH＝7.4，所以一定要在使用温度下进行配制，室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃～4℃；

3、 易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封；

4、 此缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用，所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。

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